必博彩票APP下载 下载中心 > 植物激素脱落酸(aba)elisa试剂盒技术说明

下载中心

植物激素脱落酸(aba)elisa试剂盒技术说明

点击次数:9 发布时间:2019/6/25
提 供 商: 上海古朵生物科技必博彩票APP下载 资料大小:
图片类型: 下载次数: 0
资料类型: OCX 浏览次数: 9
相关产品:
详细介绍: 文件下载    

文件下载    

【中文名称】植物激素脱落酸(ABA)试剂盒
【英文名称】Plant hormone abscisic acid,ABA ELISA Kit
【规格】96T(孔)/48T(孔)
【品牌】古朵生物
【价格】电议有折扣
【保存温度】2-8℃,避光保存
【有效期】六个月
【检测目的】用于测定血清,血浆及相关液体等样本,例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本
【适用范围】仅供科研

说明:
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.有效期:6个月
3.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
5.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。


植物组织处理方式:
植物组织的提取,不管是根茎组织还是叶片组织还是果实组织,都应该采用鲜重的计重方式
一般要遵循以下原则:
1,称取的组织重量不能低于50mg。
2,匀浆的比例按照10%,即1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液一般选取PBS(PH=7.2-7.4)
3,组织在匀浆器匀浆过程中,匀浆液应该分2次加进去,这样匀浆更充分。
4,充分匀浆完成后离心取上清,离心机的转数选取2000-3000转每分,转数不宜超过5000.离心时间为15-30分钟!


操作步骤:
各试剂在使用前平衡至室温
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样品100ul,注意不要有气泡,轻轻混匀,酶标板加上盖,37℃反应120分钟。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。
3. 每孔加检测溶液A工作液 100ul,37℃,60分钟。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加检测溶液B工作液 100ul,37℃,60分钟,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色30分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显)。
6. 依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时兰色立转黄色)。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。


注意:
1.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
2.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。


洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性:本试剂盒可同时检测改指标,且与其它相关蛋白无交叉反应。


计算:
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。


操作常见问题解析:
1.加样
在现在的ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
2.边缘效应
使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应",即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应",并且可提高测定的重复性。

 
网站必博彩票APP下载 公司简介 产品中心 招聘中心 技术支持 企业动态 联系我们
上海古朵生物科技必博彩票APP下载版权所有 主营:优质胎牛血清,EA36染色液配制,迪夫快速染色液
GoogleSitemap ICP备案号: 技术支持:
在线客服
河北快3走势图 宝乐彩票平台 伯爵彩票APP下载 河北快3走势图 博易彩票APP下载 宝乐彩票平台 百万彩票APP 伯爵彩票APP 爱乐彩票平台 河北快3走势图